Телефон: +7 921 936 2039

 

Официальный дистрибьютор голландского холдинга Avantes B.V. в России — ООО Локамед

197376 г. Санкт-Петербург,

ул. Проф. Попова, дом 15/17
телефон: (8 812) 936 20 39
факс:      (8 812) 234 59 73
e-mail:     vlad@avantes.ru


Каталог продукции 2012


Дополнительная информация: ЦЕНА


Определение концентрации нуклеиновых кислот и чистоты препарата

Метод определения концентрации нуклеиновых кислот (ДНК или РНК) в растворе основан на существовании у ДНК и РНК максимума поглощения при длине волны 260 нм. Это означает, что в растворах нуклеиновых кислот максимальная фотометрическая абсорбция наблюдается при 260 нм и прямо коррелирует с концентрацией ДНК или РНК.


Определение чистоты препарата ДНК или РНК

Отношение поглощения при длинах волн 260 нм и 280 нм (260нм/280нм) показывает чистоту препарата ДНК или РНК. Препарат считается чистым, если отношение значений 260нм/280нм приблизительно равно 1.8 для ДНК и 2.8 для РНК. В случае меньших значений показателя 260нм/280нм препарат содержит большое количество примесей белка, фенола или иных контаминирующих агентов, имеющих значительное поглощение при 280 нм.

Другим показателем чистоты препарата ДНК или РНК является отношение значений поглощения 260нм/230нм. В случае чистого препарата это соотношение обычно равно 1.8 – 2.2. Меньшие значения коэффициента 260нм/230нм свидетельствуют о загрязнении препарата компонентами, которые остаются после процедуры выделения ДНК или РНК.


  • Метод определения концентрации ДНК и РНК в растворе: на рисунке показан спектр поглощения раствора ДНК в воде с максимумом при 260 нм

  • Концентрация препарата ДНК - 3.6 мкг/мкл. Кювета с длиной оптического пути 1 мм, объем - 200 мкл

  • Отношение поглощения при длинах волн 260 нм и 280 нм (коэффициент 260нм/280нм) равен 1.73, что свидетельствует об относительно высокой чистоте препарата ДНК

  • Спектр поглощения получен как результат автоматического (программного) усреднения результатов 30 измерений продолжительностью по 10 мс

  • Определение концентрации нуклеиновых кислот и чистоты препарата можно проводить в кюветах объемом 200 мкл (длина оптического пути 1 мм), или 1000 мкл (длина оптического пути 10 мм)

  • Возможно построение отчетных бланков с графиками спектра поглощения и значениями поглощения при определенной длине волны для 12 образцов на одном бланке

  • Значения полного спектра поглощения могут быть конвертированы в формат MS Exel

При постановке измерения образец ДНК разбавляют дистиллированной водой в 40 раз (к 5 мкл раствора ДНК добавляют 195 мкл воды). Измерение поглощения при 260 нм проводят в кювете с длиной оптического пути 1 мм, используя воду в качестве референса. Значение концентрации ДНК в исходном растворе (мкг/мкл) находят, умножая значение поглощения при длине волны 260 нм на К=20.

РНК разбавляют водой в 10 раз (к 20 мкл раствора ДНК добавляют 180 мкл воды). Измерение поглощения при 260 нм проводят в кювете с длиной оптического пути 1 мм, используя воду в качестве референса. Значение концентрации РНК в исходном растворе (мкг/мкл) находят, умножая значение поглощения при длине волны 260 нм на К=4.

Rambler's Top100
© 2003-2015 ООО "ЛОКАМЕД" E-mail: avantes@rambler.ru, телефон: +7 921 936 2039, факс: +7 812 234 5973
Last Updated: 15.02 2015

спектрометр спектрометр